介绍

介绍了变换

在这个实验中,你将执行一个过程被称为遗传转化。遗传转化的字面意思是“改变引起的基因”,和发生在细胞结合,表达新的DNA的遗传物质——来自另一个有机体。转换涉及到基因插入有机体为了改变收件人有机体的表达式。遗传转化是用在许多领域的生物技术。在农业、基因编码特征如霜,害虫,或损坏抗性基因转化成植物。在生物修复中,细菌可以通过基因遗传转化使他们消化和分解污染物,如石油泄漏或重金属污染在医学上,由基因缺陷引起的疾病被基因疗法治疗;也就是说,通过基因改变病人的细胞健康的副本有缺陷的基因。

您感兴趣的蛋白质——绿色荧光蛋白GFP

您将使用一个过程将细菌与绿色荧光蛋白编码基因,GFP。这个基因是生物发光的水母的真实来源Aequorea victoria。转换过程后,细菌将表达他们新获得的基因和产生GFP,导致它们在紫外线下闪着亮绿色或蓝色光。

宿主细胞-大肠杆菌(大肠杆菌)

的细菌,大肠杆菌转换,是理想的主机,因为它是一个小的,单细胞生物,繁殖快,所以它的转换将会很快。同时,的压力大肠杆菌使用是不致病的,不让人或动物生病,它并不在实验室环境中生存。虽然它是安全的,它需要使用标准微生物实践,由你的老师。

目标

在这个实验中,你会的

  • 用一个质粒向量变换的细菌与绿色荧光蛋白(GFP)基因和抗生素耐药性的控制实验。
  • 使用热休克的转换方法大肠杆菌
  • 使用阿拉伯糖调节GFP基因的表达。
  • 描述所涉及的生物过程改变细菌细胞。
  • 计算您的转换效率。
  • 掌握基本的分子生物学技术。