简介

典型的蛋白质是作为催化剂,加速化学反应,这些反应本身需要很长时间才能发生。酶加速了细胞中发生的绝大多数化学反应。分解分子的反应(如参与消化和细胞呼吸的反应)和建立分子的反应(如参与光合作用和DNA复制的反应)都需要酶。每种类型的酶都有一个特定的形状,以补充其底物的结构。的底物是酶转化成产物的一个或多个分子。

在这次调查中,你将研究纤维素酶。纤维素酶参与了纤维素分解过程的最后一步,纤维素是一种在植物细胞壁中发现的由葡萄糖长链组成的分子。这是一种自然过程,许多真菌和细菌(如在白蚁肠道、反刍动物胃和堆肥中发现的细菌)都使用它来生产葡萄糖作为食物来源。将植物中的纤维素分解成糖也是制造燃料乙醇的重要一步。

纤维素二酶的天然底物是纤维素二糖。这是由两个葡萄糖分子组成的双糖。然而,当科学家们研究酶的功能时,最好有一种简单的方法来检测被消耗的底物的量或形成的产物的量。纤维素二糖(底物)和葡萄糖(产物)的溶液是清晰的,并且没有很多简单、廉价、快速的方法来定量检测这些分子。

为了使这个反应更容易进行,将使用一种人工底物,对硝基苯吡喃葡萄糖苷。这种人工底物也可以与酶结合,并以类似于天然底物纤维二糖的方式被分解。当人造底物,对硝基苯吡喃葡萄糖苷,被纤维素酶分解,它产生葡萄糖和p硝基酚。当p硝基苯酚与一种被称为停止溶液的碱性溶液混合,它会停止反应并使溶液变黄。黄色的量与颜色的量成正比p硝基酚。对于每一个分子p-硝基苯酚存在时,一个对硝基苯吡喃葡萄糖苷分子被分解。对于正在进行的纤维素酶反应,使用碱性溶液来显影的另一个优点是p-硝基苯酚的基本pH值也会使酶变性并停止反应。

目标

在本初步活动中,您将使用分光光度计进行测定p硝基酚浓度。你首先会得到一个p-硝基苯酚含样品的反应。接下来,您将确定一组的吸光度值p-硝基苯酚溶液的浓度已知,以便创建标准曲线。当一个吸光度图vs。将标准溶液的浓度绘制成直线关系。溶液的吸光度和浓度之间的直接关系被称为比尔定律。然后您将确定p-硝基苯酚的浓度,通过测量其吸光度,然后在标准曲线上找到相应的浓度。因为关系是线性的,你也可以计算

p-硝基苯酚浓度用公式求标准曲线。您还将确定您的初始速率p-硝基苯酚产生反应。

完成初步活动后,您将首先使用参考资料来了解更多关于生物燃料和纤维二酶催化反应的知识p在你选择和调查一个可研究的问题之前。参考文献搜索中需要考虑的一些主题是:

  • 催化剂

  • 生物燃料
  • 乙醇
  • 纤维素
  • 纤维二糖
  • 纤维二糖酶
  • 底物
  • p硝基酚
  • 比尔定律